Yu Zhaoyun, Ding Liang, Yang Hui
（Hebei University Health Science Center, Hebei Baoding 071000, China ）

Abstract A new spectrophotometric method for the determination of selenium(IV) in Chinese herbal drugs is described. The　selenium　(IV) catalyzed　oxidation ofbromophenol blue-butylrhodamine B with H in nitric acid medium.and as the redox reaction proceeds, the purple color is decolorized.The decolorant reactionshows a good linear　relationship with　the　amounts　of　selenium　(IV). The detection range of the method is 0-5gL^-1. Samples after digest ofHNO-HClO determined the amounts of selenium(IV). The method is selectivity and precise.  It was applied to the determination of selenium in Chinese herbal drugs and with satisfactory results.

应用等色染料离子对的褪色反应测定中草药中的硒（IV）

于朝云，丁良，杨慧
（河北大学医学部，保定071000）

摘要建立了测定中草药中硒的一种新的催化动力学光度法。在酸性介质中硒(IV)能催化氧化溴酚蓝丁基罗丹明的褪色反应硒(IV)含量在0-5gL^-1范围内与褪色反应速率成正比。样品经HNO-HClO消化后直接测定硒(IV)的含量该方法具有良好的选择性和准确度。用于中药材中硒的测定结果令人满意。
关键词 等色染料离子对，催化，硒

硒是人体必需的痕量元素之一。适量硒可降低癌症和心血管疾病的发病率但硒含量过高会引起中毒性病变合理补硒对保护人体健康有重要意义。因此探索中草药中痕量硒的实际含量无论是对药理活性的研究还是对生命科学的探讨都有较大的实际意义和应用价值。测定硒的方法有原子吸收分光光度法、荧光分析法^[1]、色谱法、极谱法、中子活化分析法等这些方法易受干扰仪器昂贵操作费时或试剂有毒。催化动力学光度法可用于多种元素的分析^[2]。本实验研究了酸性介质中硒Ⅳ催化双氧水氧化等色染料离子对即溴酚蓝-丁基罗丹明的的褪色反应，表明催化反应速率1g(A/A)与硒Ⅳ含量呈线性关系建立了测定痕量硒的新方法本方法具有操作简单、灵敏度高、重现性好和分析费用便宜等特点适用于测定样品中的痕量硒Ⅳ，取得较好效果。

1 主要仪器与试剂
1.1仪器
WFZ800-D3A紫外可见分光光度计北京第二光学仪器厂); pHS-3C酸度计； 501型超级恒温槽上海实验仪器厂。
1.2试药与试剂
2000·^-1 Se (Ⅳ标液用时稀释；溴酚蓝溶液 0.001 mo·^-1； 丁基罗丹明溶液0.001 mo·^-1; 30%的溶液； 0.025 mo·^-1HNO溶液； NH·O-NHCl缓冲溶液pH值为9.3；NaOH-KHPO缓冲溶液pH值为6.8；所用试剂均为分析纯分析用水为二次蒸馏水。

2 方法与结
2.1 实验方法
取两只规格一致的10ml具塞比色管其中一只加入一定量的Se (Ⅳ标液作催化反应另一只不加Se (Ⅳ标液作非催化反应，然后分别加入0.2 ml HNO溶液、溴酚蓝丁基罗丹明甲苯萃取液5 ml、溶液0.5 ml,用二次水稀释至刻度摇匀同时置于60ºC的恒温水浴中反应12min后 立即取出流水冷却3min,与室温平衡。通过进行波长扫描得到吸收曲线显示等色离子对在硝酸介质中的最大吸收位于545nm。以水作参比，用1cm比色皿于545nm处分别测定非催化反应溶液的吸光度和催化反应溶液的吸光度值A,发现加Se(Ⅳ溶液的吸光度明显小于不加Se(Ⅳ溶液的吸光度表明Se(Ⅳ显著催化对等色离子对的氧化反应随着加入硒量的增多氧化作用增强。测量非催化体系和催化体系的吸光度和A,并计算lg(A/A),利用lg(A/A)与硒溶液浓度的关系绘制工作曲线。
2.2 反应介质及等色离子对用量的影响
实验表明,Se(Ⅳ催化氧化等色染料离子对这一反应在稀硝酸介质中最为强烈,HNO用量在0.2ml附近灵敏度最高，且体系稳定因此采用0.2ml硝酸溶液。等色染料离子对的甲苯萃取液用量在4-6ml催化效果最明显本实验采用5.0ml。
2.3 反应温度的影响
实验表明反应温度升高反应速度加快。但温度太高，操作不便且非催化反应速度明显加快,1g(A/A)减小。因此本实验选择反应温度为60±0.5ºC。
2.4 反应时间的影响
加热时间在10-15min内,1g(A/A)与反应时间呈线性关系。本实验选择加热时间为12min。由于室温下本体系反应较慢因此可通过流水冷却终止反应。实验表明流水冷却2-3min即可终止反应。
2.5 工作曲线与方法的灵敏度
在确定的实验条件下仅改变Se(Ⅳ含量进行试验结果表明在0-5gL^-1范围内与1g(A/A)呈线性关系工作曲线回归方程式为1g(A/A)=0.11118C_Se(Ⅳ·^-10.01991,相关系数r=0.9976。
2.6 共存离子的干扰
    在样品中采用了阳离子交换树脂除去干扰离子^[3]。在一系列10mL溶液中，分别含有20g Se (IV) 和´ 10 mg所需的阳离子。每种溶液均通过一段10cm长的阳离子交换树脂柱。当相对误差控制在±5%之内，测定时允许1000倍量的、Na、Mg²⁺，200倍量的Cu²⁺、Zn²⁺，100倍量的Cd²⁺、Ba²⁺，50倍量的Br、IO存在，NO 强烈干扰，不允许存在。
2.7 样品含量分析
中草药先进行HNO-HClO消化处理^[4]，通过阳离子交换树脂除去干扰离子，将洗脱液加水稀释至50mL，按上述实验方法测定样品中的Se（IV）含量。
样品中Se（IV）的含量可通过相对应的标准曲线获得。中草药中硒（IV）含量的测定结果列于表。

表中草药样品含硒量及回收率的分析

样品	含硒量Se(IV) g/g)	加入量(mL)	回收率（%）
三菱	0.7787	1.0	103.8
长春花	0.8471	1.0	101.8
冬凌草	0.9245	1.0	97.5
丹参	0.9535	1.0	97.5
红参	0.6691	1.0	96.2
玄 参	0.4445	1.0	95.8